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1.
Rev. mex. reumatol ; 9(2): 91-4, mar.-abr. 1994. tab
Article in Spanish | LILACS | ID: lil-139925

ABSTRACT

Se obtuvo extracto total de bazo humano (EBH), purificado por cromatografía de intercambio iónico (DEAE) y filtración molecular; la actividad biológica de las proteínas Ro y La en cada uno de los pasos de purificación fue determinada por pruebas de precipitación en gel e inmunoelectrotransferencia, utilizando sueros monoespecíficos anti-Ro y anti-La. La fracción obtenida en filtración en gel fue sometida a electroforesis en geles de poliacrilamida en condiciones reductoras, las bandas proteicas correspondientes a las proteínas Ro y La fueron eluídas de los geles. El análisis peptídico de las proteínas eluídas fue realizado mediante precipitación con acetona, oxidación, tripsinización, danzilación y separación en cromatografía de capa fina, identificándose con luz UV tres péptidos para Ro y cuatro para La. El contenido relativo de aminoácidos se realizó precipitando las proteínas Ro y La, hidrolizándolas con HCL, esterificándolas y acilándolas para ser inyectadas en un cromotógrafo de gases, permitiendo identificar en la proteína La los animoácidos: alanina, glicina, leucina, serina, ácido aspártico, fenilanina, lisina y arginina, y en la proteína Ro: alanina, glicina, leucina, serina, ácido aspártico, ácido glutámico, fenilalanina, lisina, arginina, valina e isoleucina


Subject(s)
Autoimmune Diseases/physiopathology , Autoimmune Diseases/immunology , Spleen/cytology , Spleen/immunology , Protein Conformation , Chromatography, Thin Layer/methods , In Vitro Techniques , Peptides/analysis , Peptides/chemistry , Ribonucleoproteins/analysis , Ribonucleoproteins/chemistry , Amino Acids/analysis
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